为了保证消毒剂的药物浓度在养殖水体中的准确性，采用PVC板制作了12个规格一致的内口径边长60厘米的正方形、高度2.48米的围隔（图1）。对ClO2片剂和ClO2粉剂，临用前打开包装袋，根据围隔内水体的体积计算用药量。随着这个结果的发布，也就是意味着ClO2制剂已经被农业农村部认定为我国水产用“国标渔药”了。结果导致在我国渔药市场上流通的ClO2制剂陷入了泥沙俱下、鱼目混珠、极为混乱的局面！
文/ 华中农业大学 陈昌福、武汉科研时代生物技术有限公司 周鑫军
在水产养殖过程中，采用各种消毒剂实施所谓的“四消”（苗种、饵料、工具和食场消毒），已经是我国水产养殖业者对水产养殖动物疾病防控中采用的常规措施。
二氧化氯（分子式为ClO2）虽然作为“国标渔药”已经被农业农村部移出了清单，但是，不少渔药制售企业将其作为“非药品”，迄今为止依然在水产养殖中被大量地使用着。
在水产养殖过程中使用的ClO2制剂大致有3种剂型，即水剂、粉剂和片剂。利用ClO2水剂对养殖水体进行消毒时，只需要在测量水体后根据养殖水体体积，直接泼洒ClO2水剂至养殖水体中达到一定药物浓度即可；利用ClO2粉剂对养殖水体进行消毒时，就需要先用少量池水将ClO2粉剂稀释、活化15分钟 左右后，再将其泼洒在养殖水体中达到一定药物浓度；而采用ClO2片剂时，养殖业者大多是根据产品说明书中规定的用药剂量，采用直接将其ClO2片剂抛洒在养殖水体中的用药方法。
为了探讨不同剂型的ClO2制剂的使用方法对养殖水体消毒效果的影响，本试验利用检测消毒后养殖池水中可培养细菌数量变化的方法，对ClO2制剂的使用方法与消毒效果的关系进行了初步评价。现将结果报告如下：
1.材料与方法
1.1池塘水体消毒试验地点及条件
本试验在武汉市新洲区汪集镇鱼苗孵化场的养殖池塘中进行。该养殖池塘7亩，水深2.5米左右。试验过程中，于18:30测定1.0m水深处的水质指标为亚硝酸盐低于0.05mg/L、氨态氮0.2mg/L、溶解氧6.5mg/L以上，pH 8.5。试验期间水温变化范围26.0~27.0℃。
为了保证消毒剂的药物浓度在养殖水体中的准确性，采用PVC板制作了12个规格一致的内口径边长60厘米的正方形、高度2.48米的围隔（图1）。
图1.示边长60厘米、高2.48米的正四方形的PVC板围隔
围隔在使用前，将其放置在养殖池塘中浸泡了4天。正式试验时，将围隔以站立的形式放置在养殖池塘中（图2）。精确测定围隔中的池水体积后，根据围隔内水体的体积计算出用药量，定量使用几种消毒剂。
图2.设置在养殖池塘中的PVC板围隔
1.2供试药物及其用药剂量
用于本试验的2种来自不同公司生产的ClO2片剂，以编号Ⅰ、Ⅱ号片剂表示，另外2种ClO2粉剂，以编号Ⅰ、Ⅱ粉剂表示，共4种供试消毒剂药物。
对ClO2片剂和ClO2粉剂，临用前打开包装袋，根据围隔内水体的体积计算用药量。将编号为Ⅰ、Ⅱ号的2种ClO2片剂，分别将每种片剂直接抛洒在2个围隔内，而将在Ⅱ号ClO2片剂粉碎后，溶解在水中并活化15分钟后，泼洒在2个围隔中。将编号为Ⅰ和Ⅱ号ClO2粉剂用池塘水将药物稀释、活化15分钟后，泼洒在围隔内水体中，使不同围隔内水体中的ClO2片剂或者粉剂的浓度，均分别达到0.90mg/L的浓度。
1.3消毒效果的监测
在围隔中用药结束后，分别在经过1.5小时和3小时后，在围隔内利用采水器分别在离水面0.3米、1.0米和2.0米处采集水样（图3），同时在围隔外的池塘中同样水层采集水样，作为为用消毒剂的对照组。
图3.用采水器在消毒后的围隔水体中采集水样
将采集的水样盛装在经过高压灭菌处理的玻璃试管内，并置放与带有冰块的采样箱内带回实验室，在30分钟时间内完成从采水样到在培养基上接种细菌的过程。
采集的水样带回实验室后，在无菌条件下从每个水样中吸取500.0μL，在灭菌后的试管中用灭菌生理盐水进行10倍、100倍、1000倍和10000倍的系列稀释。分别从稀释后的水样中吸取50.0μL池塘水，接种在盛有BHIA培养基的培养皿中，每个稀释度的水样接种3个培养皿。接菌后的培养皿放在28℃的恒温培养箱中，培养24小时后，通过计数培养皿中出现的菌落数，评价各种消毒剂在池塘水体中的杀菌效果（图4）。
图4.通过细菌培养法判断不同ClO2制剂在池塘水体中的消毒效果
2.结果
2.1用药1.5小时后水体中细菌数量的变化
在围隔中投放ClO2制剂消毒剂结束后的1.5小时，分别从用药浓度为0.9mg/L的ClO2粉剂组、ClO2片剂组和对照组各围隔水体中，用采水器采集池水，带回实验室对养殖水体中细菌进行细菌培养养的结果如图1所示。由图1可以看出，当ClO2制剂的用药浓度为0.9mg/L的条件下，稀释并活化15分钟后泼洒在围隔中的ClO2粉剂，在泼洒用药1.5小时后，显示出了对围隔水体中细菌良好的杀菌效果；而直接抛洒在围隔水体中的ClO2片剂，与未用药物的对照组相比，未显示出明显的杀菌效果。
图1.对不同ClO2制剂消毒1.5小时后养殖水体中细菌的培养结果
注：“A”代表未用消毒剂的对照组；“B”代表片剂用药组；“C”代表ClO2粉剂用药组；“Ⅰ”代表各组的第1个围隔，“Ⅱ”代表各组的第2个围隔；“Q”代表将水样经过了1000倍的稀释；“W”代表将水样经过了10000倍的稀释；“a”代表30厘米水深处采取的水样，“b”代表100厘米水深处采取的水样，“c”代表200厘米水深处采取的水样。
2.2用药3小时后水体中细菌数量的变化
在围隔中投放几种ClO2制剂结束3小时后，分别从各围隔水体中，用采水器采集池水，带回实验室对水体中细菌进行细菌培养的结果如图2所示。由图2可以看出，当ClO2制剂的用药浓度均为0.9mg/L的条件下，将ClO2粉剂稀释并活化15分钟后泼洒在围隔中的2个试验组，以及将ClO2片剂粉碎后稀释并活化15分钟后泼洒在围隔中的1个试验组，在泼洒用药3小时后，均显示出了对围隔内水体中细菌的良好的杀菌效果；而将ClO2片剂直接抛洒在围隔水体中的试验组，与对照组相比，则未显示出明显的杀菌效果。
图2.对不同ClO2制剂消毒3小时后养殖水体中细菌的培养结果
注：“A”代表未用消毒剂的对照组；“B”代表ClO2的Ⅰ号片剂直接抛洒用药组；“C”代表将ClO2的Ⅱ号片剂经粉碎稀释在水体中并活化15分钟后泼洒用药组；“D”代表ClO2的Ⅰ号粉剂稀释在水体中并活化15分钟后泼洒用药组；“E”代表ClO2的Ⅱ号粉剂稀释在水体中并活化15分钟后泼洒用药组；“W”代表将水样经过了10000倍的稀释；“a”代表在30厘米水深处采取的水样，“b”代表100厘米水深处采取的水样，“c”代表200厘米水深处采取的水样。
3.讨论
在2004年11月左右，农业农村部启动了所谓“兽药地方标准升国家标准”的工作，随后农业农村部受理了一些渔药企业提交的将ClO2制剂作为水产用兽药地标升国标的申请，并且顺利地通过了由中国兽医药品监察所组织的相关专家评审，其评审结果发布在《兽药地方标准升国家标准目录（7）》中。随着这个结果的发布，也就是意味着ClO2制剂已经被农业农村部认定为我国水产用“国标渔药”了。
然而，由于当时用于控制ClO2制剂质量的“国家（试行）标准”，并不能做到真正有效地控制ClO2制剂的产品质量，部分心术不正的人因此而制售了大量假冒伪劣的ClO2制剂。结果导致在我国渔药市场上流通的ClO2制剂陷入了泥沙俱下、鱼目混珠、极为混乱的局面！
正是由于ClO2制剂的产品“质量标准”不能控制产品的质量，在2012年4月17日农业农村部发布的1759号公告，也就是在公布第三批地标升国标《兽药试行标准转正标准目录（3）》中，ClO2制剂作为水产用“国标渔药”的“国家（试行）标准”被从目录中清除了。在该公告中，农业农村部对清除这个“国家（试行）标准”的原因说明是，“不同企业该类产品的处方和剂型、活化所需酸的比例、反应时间等均不一致，试行质量标准中一步碘量法无法控制产品中二氧化氯的含量”。也就是从2012年后，部分渔药制售企业开始将ClO2制剂作为水产用“调水改水”的“非药品”进行推广了。在ClO2制剂的剂型方面，除了原来的水剂和粉剂之外，还推出了因为便于使用而深受广大水产养殖业者欢迎的ClO2的片剂。
无论是将ClO2制剂作为消毒剂使用的水产用“国标渔药”，还是将其作为“改水调水”的“非药品”使用，其目的无一例外都是为了杀灭水体中的微生物。
水产养殖业者将ClO2片剂直接抛洒在水产养殖水体中，虽然具有使用简便而且使用者不会受到氯气味的刺激等优点。但是，将其ClO2片剂直接抛洒在养殖水体中，是否具有与将ClO2粉剂用水稀释并活化后泼洒在水体中的方法一样的消毒效果？一直没有见到相关的试验报告。本试验的结果证明了将ClO2片剂直接抛洒在养殖水体中的使用方法，没有出现产品使用者期待的杀菌消毒效果。这也是我们要告诫广大的水产养殖业者需要充分注意的。
最后，还需要说明的一个问题是，因为我们在使用这几种ClO2制剂，尚没有对其性状进行检测，因此还难以判定这些供试产品的质量优劣。不过，无论这些号称ClO2片剂的质量究竟如何，将其直接抛洒在养殖水体中，是不会获得理想的消毒杀菌效果的。
【关键字】：二氧化氯消毒非药品水产养殖
